目前检测橄榄油中叶绿素铜的方法,主要有分光光度法、液相色谱法和液相色谱串联质法。其中,液相色谱串联质谱法相比其他方法,不仅灵敏度高,而且能够更加准确地进行定性定量分析,所以通常被作为橄榄油中是否含有叶绿素铜的判定方法。然而,该法在上机前,需要使用固相萃取小柱来去除橄榄油当中油脂的干扰,前处理操作不仅繁琐费时,而且容易给分析结果导入误差。
将岛津超临界流体色谱SFC和反相液相色谱组合,搭建了一套二维柱切换SFC-LC系统,并配备质谱检测器,实现了橄榄油中非添加叶绿素铜的快速自动化检测。使用该系统,无需对橄榄油进行任何复杂前处理,只需用正相溶剂简单稀释后就可以直接进样分析。
简单:使用正己烷将植物油约10倍稀释后,即可直接进样分析;
快速:整体分析时间从原来的数小时缩短至20min以内
准确·回收率接近100%,精细度好,准确度高;
环保:使用超临界CO2流体替代有机溶剂,不仅节能环保,且运行成本低。
3.1 分析条件
液相条件:
SFC净化柱:Shim-pack UC-X Diol4.6x250 mm,5 um
反相分离柱:InertsilODS-P 2.1x 150mm,5um
SFC流动相:SF-CO2/异丙醇=86/14
进样体积:20 uL
BPR温度:40°C
前处理柱: Shim-pack VP-ODS 4.6x50mm,5 um
柱温:40°C
反相流动相:异丙醇
洗脱方式:梯度洗脱
质谱条件:
离子源:APCI(-)
接口电压:-3.5 kV
雾化气: 氮气3 L/min
DL管温度: 250°C
接口温度:350°C
加热模块温度: 300°C
扫描模式:多反应监测
3.2 数据结果及分析
1)叶绿素铜色谱图
2)标准曲线呈现良好线性关系,检出限为2ug/kg
3)橄榄油样品叶绿素铜的保留时间和峰面积重复性结果良好 (n=6)
4)不同加标浓度的样品均得到接近100%的加标回收率结果
5)实际样品分析,橄榄油1未检出,橄榄油2和3检出叶绿素铜含量
采用SFC-LC-MS/MS在线前处理二维系统测定橄榄油中的叶绿素铜含量,不仅可以显著缩短前处理时间,简化过程,减少由于传统前处理方法带来的损失,而且还可以有效减少有机溶剂的消耗,是一种绿色环保的检测技术。
通过将超临界流体色谱与反相液相色谱联用,并配备APCI源的MS/MS检测器,实现了橄榄油中叶绿素铜的快速检出,可用于鉴别伪橄榄油。
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